众所周知，猪圆环病毒2型（PCV2）是一种免疫抑制性病毒，并会提高其他病原微生物的协同感染的风险，因此，成功的免疫策略非常重要，特别是生长肥育猪群，必须以PCV2以及其他重要病原体为预防目标。重要的是，研究认为，未免疫猪血清中PCV2高水平病毒含量不但会影响猪的日增重和饲料转化率，而且会增加其他病原体协同感染增加生长猪死淘率和治疗药费。而断奶前后仔猪免疫疫苗能降低PCV2的病毒血症，因而能将发病的风险降到较低水平。
采用PCR方法评估PCV2疫苗能否降低PCV2病毒血症的试验在黑龙江省某猪场进行，随机选取2～4 周龄健康仔猪若干头，以耳号标记；猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）购买自哈尔滨维科生物技术开发公司，生产批号：2013006；TIANamp genomic DNA kit购买自天根生化科技（北京）有限公司；引物由北京华大基因科技有限公司合成； Premix Ex Taq HS kit购买自TaKaRa公司。
免疫程序设计
本实验按不同日龄、不同剂量和不同免疫次数制定10组免疫程序，每组随机选取5头仔猪。一次免疫程序分组为2 周龄单剂量组（A1）、2 周龄双剂量组（A2）、3 周龄单剂量组（B1）、3 周龄双剂量组（B2）、4 周龄单剂量组（C1）、4 周龄双剂量组（C2）；加强免疫程序分组为3 周龄1头份+0.5头份组（D1）、3 周龄0.5头份+1头份组（D2）、3 周龄1头份+1头份组（D3）、空白对照组（E）。其中D3组为该疫苗的标准免疫程序。免疫后0 d、7 d、14 d、21 d、35 d采血，分离血清用于血清抗体检测和核酸检测。
PCV2核酸检测
采用TIANamp genomic DNA kit 提取血清中病毒的DNA进行PCR扩增，检测免疫后0 d和免疫后28 d血清中病毒核酸的情况。PCR扩增采用的引物为PCV2-F56：5’- CAG CAA GAA GAA TGG AAG AAG CGG A-3’；PCV2-R1112：5’-CCA GGA CTA CAA TAT CCG TGT AAC T-3’（范培虎 等，2011），反应体系为25 μL：12.5 μL Premix Ex Taq，10 μL 无菌水，引物稀释至20 pmol/μL ，上下游引物各0.25 μL，模版2 μL。反应程序为：94℃ 2 min，[94℃ 30 s，57℃ 30 s，72℃ 1 min]×35 cycle，72℃ 10 min。结果采用Excel软件进行统计分析。
血清中PVC2核酸检测结果
表1免疫前后各实验组PCV2核酸检测结果
Table 1 The PCV2 gene detection result of each group at different time
| 组 别 Groups | 免疫当天 Day at immunization | 免疫28天 28 days post immunization |
| A1 组 | 2/5 | 1/5 |
| A2 组 | 3/5 | 2/5 |
| B1 组 | 0/5 | 0/5 |
| B2 组 | 0/5 | 0/5 |
| C1 组 | 3/5 | 1/5 |
| C2 组 | 3/5 | 2/5 |
| D1 组 | 2/5 | 0/5 |
| D2 组 | 2/5 | 0/5 |
| D3 组 | 1/5 | 0/5 |
| 对照组 Contorl | 2/5 | 4/5 |
小结:哈兽研牌猪圆环病毒2型疫苗(LG株)能降低免疫猪血清PCV2病毒血症，进而降低死淘率，提高日增重和饲料转化率。
来源：哈兽维科
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