阻断试剂盒基于液相阻断原理，反应孔的颜色深浅与血清中的抗体含量成反比。阻断ELISA采用了单克隆抗体检测，可大大提高检测的特异性，但实际检测的对象却只是针对单一表位的抗体（检测为特异性抗体）。因此，当阳性血清中针对该表位抗体丰度不高时，会导致检测的敏感性降低（出现假阴性结果）。
间接试剂盒基于间接ELISA 原理，反应孔颜色深浅与结合在反应板中的特异性抗体的量成正比。由于间接ELISA检测的是针对包被抗原蛋白的多克隆抗体（检测为猪体内的总抗体），因此会提高检测的敏感性。
荧光抗体病毒中和试验（FVNT）是OIE 推荐方法，为猪瘟抗体检测的“金标准”。有临床试验表明对两种ELISA抗体检测试剂盒检测结果存在差异的283 份血清样本采用FVNT的方法进行了确认检测，结果显示，间接试剂盒与FVNT 的符合率为69.26%，阻断试剂盒与FVNT 的符合率为28.62%。不符合样本的确认结果表明，间接试剂盒能更真实地反映疫苗免疫后的中和抗体水平，而阻断试剂盒对阳性血清存在明显的漏检状况。
通过对免疫猪抗体增长趋势的检测结果看出，猪瘟抗体间接ELISA对抗体由阴转阳的检出时间为免疫后的12-15d，而阻断ELISA试剂盒检测表明在免疫后的15-28d陆续由阴性转为阳性。由于间接ELISA 检测的是针对E2蛋白的所有抗体，而阻断ELISA检测的是针对E2蛋白某一个表位的抗体，在免疫初期由于抗体丰度的不同，导致间接ELISA对阳性抗体的检出要早于阻断ELISA。说明间接ELISA敏感性更高，更适合免疫后的早期监测，疫苗效力监测和免疫程序的制定。
猪瘟抗体间接ELISA试剂盒可以对不同抗体水平的猪血清进行有效的区分，可以从IE值上直观的比较两份血清抗体水平的高低。间接法试剂盒中所采用的标准阳性血清为反复免疫的猪瘟抗体强阳性血清，而待检的免疫血清在免疫后213d达到最高值时，仍不到阳性对照血清OD值的80%。因此说明，间接ELISA试剂盒能够在更宽的范围内对抗体水平进行区分。而阻断ELISA试剂盒采用的是阻断ELISA原理，当抗体达到可以将包被的抗原全部封闭的水平后，就出现了检测平台期。因此，阻断ELISA只能在一定范围内对抗体水平的高低进行区分。
在进行田间大规模普查时，需要对某一地区，某一群体的整体免疫状况进行分析，因此对检测方法的敏感性要求较高，间接ELISA更适合于我国猪场大规模猪瘟疫苗普免抗体水平的普查。针对种猪场猪瘟的净化，需要对每头动物的抗体水平进行检测评价的同时，还要排除其他疫病阳性抗体的干扰，因此对检测方法的特异性要求较高，荧光抗体病毒中和试验为金标准。在实际应用过程中，一定要对试剂盒的质量进行严格的甄选，并且根据实际应用对象选择适当的检测方法。(文中数据来源：国家猪瘟参考试验室)
来源：南京天邦
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