大肠杆菌病[1,2]是由大肠埃希氏菌的一些菌株引起的一类动物疾病的总称。自1894年本病被报道以来,20世纪随着养殖业的巨大发展,该病在各国流行日趋严重,并导致巨大的经济损失。引起雏鸡大肠杆菌病的菌型有O1K1、O2K2、O1K19、O2K1、O78K80[3]。大肠杆菌病的临床症状和病理变化多变,且多与病毒性疾病和其它细菌性疾病并发或继发,给养禽业带来很大的危害,因而对该病的防治十分重要。 防治大肠杆菌病的药物有许多,在抗生素发现的初期对该病的防治起到了积极的效果,但是随着对某种抗生素的长期使用或不合理地使用,引起大肠杆菌产生了耐药性,不仅造成药物的浪费,同时也贻误了治疗时机,给养殖户造成了很大的经济损失。药物敏感性试验,是一项药物体外抗菌作用的测定技术,通过本试验,可选用最敏感的药物进行临诊治疗,同时也可根据这一原理,可以判定某一地区大肠杆菌的耐药情况。
1材料和方法
1.1 试验材料1.1.1含细菌的病料 2011年12月至2012年7月山西长治地区平顺县、壶关县、长子县、长治县的蛋鸡场3个,肉鸡场2个,种鸡场1个,在山西农业大学病理试验室病理诊断时取病死鸡组织(脾脏、肺脏、肾脏、肝脏)。1.1.2药敏纸片 杭州天和微生物试剂有限公司 批号:200904141.1.3培养基 营养琼脂 (北京奥博星生物技术有限责任公司 批号:20090602) 营养肉汤 (北京奥博星生物技术有限责任公司 批号:20100116) 麦康凯琼脂(杭州天和微生物试剂有限公司 批号:20090516)1.1.4主要仪器 电热恒温培养箱 (公私合营华达理化器材厂) BC/BD-220GS海尔电冰柜(青岛海尔股份有限公司) SW-CJ-1F超净工作台(苏州净化设备有限公司) 奥林巴斯生物显微镜(日本奥林巴斯株式会社 )1.1.5其他 灭菌棉拭子、试管、平皿、酒精灯、铂金耳、镊子等。1.2 试验方法 1.2.1培养基的制备 营养琼脂培养基:取营养琼脂4.5g,加入100mL蒸馏水中,加热煮沸溶解,经121℃ 15min灭菌,冷却后,倾注无菌平皿,37℃温箱中放置48h左右,检查无菌后,4℃冰箱保存备用[4]。 营养肉汤培养基:取营养肉汤5.0g,加入100mL蒸馏水中,加热溶解,分装到试管中,经121℃15min灭菌,冷却后,于37℃温箱中放置48h左右,检查无菌后,4℃冰箱保存备用[4]。 麦康凯琼脂培养基:取麦康凯琼脂5.1g,加入100mL蒸馏水中,加热煮沸溶解,经121℃15min灭菌,冷却后,倾注无菌平皿,37℃温箱中放置48h左右,检查无菌后,4℃冰箱保存备用[4]。1.2.2 病料的采集与分离鉴定培养 无菌采集病变的内脏组织(打开病死鸡胸腹腔用酒精灯烧灼手术剪,用手术剪在病死鸡肝脏、脾脏、肺脏、肾脏烧灼,杀灭杂菌,再次烧灼后剪开已处理过部位,烧灼接种环后,待其温度降下从切口进入内脏,晃动接种环后取出)在营养琼脂平板上划线做分离培养,在麦康凯琼脂平板上划线做鉴别培养,同时涂片染色镜检。1.2.3增菌培养
……
……
本文全文刊于本杂志2012年11月刊,可从知网下载或向本刊订阅。
原创文章,作者:刘 少娟,如若转载,请注明出处:http://zgdwbj.com/archives/10768