禽传染病危害养殖业的发展,通过药物治疗存在药物残留和污染环境,疫苗免疫有时效果也不理想。因此日常管理要通过提高动物自身的抵抗力,增强免疫细胞的活性来达到预防疾病的目的。选取了15味具有免疫增强作用的中药,组成不同处方,经过筛选最终确定了本处方,并命名为归芪饮[1]。为了最大限度的提高药效,根据主要成分的特点,采用水提取 [2]工艺进行药物提取。影响提取效果的主要因素有加水量、提取时间、提取次数[3]等,以黄芪甲苷,总多糖和干膏率为考察对象,采用正交试验对以上三个指标进行优化,确定最佳的提取工艺。
1 材料与方法
1.1材料1.1.1 试验药品 中药饮片由安国祈瑞中药材有限公司提供; 黄芪甲苷购自中国药品生物制品检定所。1.1.2 主要仪器 高效液相色谱仪LC-20AT(日本岛津);UV754N紫外-可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);高速冷冻离心机 CR21GIII (日本日立);Discovery 电子天平 ( DHAUS);索氏提取器SXT-02(上海五相仪器仪表有限公司);HH-4 数显恒温水域过滤(常州国华电器有限公司);真空干燥箱DZF-6020型 (上海精宏实验设备有限公司)。1.1.3 试剂 A.正丁醇和蒸馏水混合(混合比例为1∶1),振摇,混匀,放置过夜。得到的混合液分层,上层为水饱和的正丁醇溶液,下层为正丁醇的饱和水溶液。 B.1%NaOH 10g NaOH溶解在100mL的水中,然后在容量瓶中定容到1000mL。 C.5%苯酚溶液 苯酚100g,铝片0.1g,NaHCO3 0.05g,加热蒸馏,收集182℃蒸馏液,然后称取5g苯酚,在容量瓶中定容到100 mL色谱级乙腈 Merck;色谱级甲醇 Tidea 公司;其他试剂为分析纯。1.2方法1.2.1吸水率的测定 6种中药材按照处方比例混匀之后,称取3份,每份100 g,每份加1000 mL的水浸泡,每隔20 min观察浸透心程度。至全部透心。测定剩余液体的量。 吸水率=(加入水量-滤液量)/药材量1.2.2 黄芪甲苷的测定1.2.2.1 黄芪甲苷供试品的制备 取供试药品10mL,加乙醚10mL萃取,分取水层,用水饱和正丁醇(20、20、20、10、10mL)萃取5次,合并正丁醇液,用1 % NaOH溶液振摇提取4次(每次20mL),弃去碱液,正丁醇液用正丁醇饱和水洗涤3次(每次20mL),弃去水层,正丁醇蒸干,残渣加甲醇5 mL使溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤后作为供试品溶液上样检测。
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本文全文刊于本杂志2013年5月刊,可从知网下载或向本刊订阅。
原创文章,作者:刘 少娟,如若转载,请注明出处:http://zgdwbj.com/archives/10767