传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由双RNA病毒科,禽双RNA病毒属的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)引起幼鸡的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。本病在世界养鸡国家和地区广泛流行,也是我国近几年来严重威胁养鸡业的重要传染病之一。IBDV引起3周龄以内或更大的鸡发病和死亡,同时可引起小日龄鸡感染产生严重的、长期的免疫抑制,降低机体对其他病原或抗原的免疫应答,与其他病毒或细菌混合感染时病情严重,继发性感染也显著增加。在临床中鸡群接种传染性鸡传染性法氏囊病(IBD)疫苗后,有时还会出现鸡传染性法氏囊病病例,其主要原因是疫苗保护率低和某些免疫抑制因素所致。 近些年来,从天然产物中特别是利用中药开发出免疫促进、免疫调节和免疫抑制药物是免疫治疗的重要方向。传统中药免疫增强剂的高效性、安全性、稳定性成为研究的重点。本次试验验证中药组方紫石散对由于IBDV引起的肉鸡免疫抑制的情况能否产生影响,是否能起到免疫调节和促进的作用。紫石散由紫锥菊、黄芪、石菖蒲等中药组成。1材料与方法
1.1试剂与药品 中药免疫增强剂紫石散,由主要由紫锥菊、黄芪、石菖蒲等组成。采用中药多功能提取器提取其复合有效的生物活性物质,经浓缩喷雾干燥制成散剂。主要含有中药多糖、黄酮、菊苣酸、多酚等。1.2主要试剂和仪器设备 EPICS-XLII型流式细胞仪;鸡CD4-PE、CD8-PE 单克隆抗体(美国Southern Biotechnology Inc(SBA)公司产品,购自北京中衫公司,货号:D171-T107、A0203-V457)。1.3动物分组与处理 1日龄罗斯308肉雏鸡正常饲养至6日龄,选体重、发育及健康状况接近的150羽,随机等分为A,B,C,D,E 5个大组,每组30只。其中紫石散分为3个剂量组:A组为低剂量组(1%);B组为中剂量组(1.5%);C组为高剂量组(3.0%); D组为对照组,对照组为正常免疫不用药组。6日龄肉雏鸡开始饲喂添加药物的饲料,连续7天。自由饮水,常规饲养管理。13日龄进行法氏囊弱毒苗接种免疫,两倍剂量滴鼻点眼。1.4测定指标 ELISA检测IBDV抗体检测 :在20、27、34日龄,每剂量组随机取10只肉鸡,翅静脉采血,3000 r/m.离心15 min,吸取血清检测IBDV抗体。根据抗原抗体特异性结合的性质,选用种属特异性的酶联免疫分析试剂盒测定细胞因子的含量:按照试剂盒说明书操作,试剂盒反应终止后,在酶标仪450nm波长处读取吸光度(optical density, OD)值,利用已知浓度的标准样品OD值绘制标准曲线,据此标准曲线计算各细胞因子含量。
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本文全文刊于本杂志2012年9月刊,可从知网下载或向本刊订阅。
原创文章,作者:刘 少娟,如若转载,请注明出处:http://zgdwbj.com/archives/10093