徐国栋
(天津市动物疫病预防控制中心 天津 3004002)
摘要:本文对近十年来国内猪圆环病毒Ⅱ型的流行状况进行了综述,包括感染抗体的检测和病原学的检测,并对可利用数据进行了统计分析,最终总结出近十年来国内猪PCV2感染的流行特点。
关键词:猪圆环病毒;Ⅱ型;流行;抗体检测;核酸检测
猪圆环病毒(porcine circovirus PCV)包括PCV1和PCV2两种血清型, 一般认为PCV1无致病性,仅感染PK-15细胞。PCV2具致病性,能引起猪的多种疾病综合征,如断奶猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合征、猪呼吸道综合征等。笔者综述了自2004年-2012年间国内猪群中猪圆环病毒Ⅱ型感染情况
1 国内猪群PCV2感染状况
1.1 非免疫猪群血清中感染抗体检测情况
2004年11月-2005年10月,赵荣茂等用ELISA法对北京某规模化猪场的1074份血液样品进行了PCV2抗体检测,结果发现平均阳性率为68.72%(738/1074),统计表明不同猪亚群抗体阳性率不同,经产母猪、育肥猪、哺乳仔猪、保育猪抗体阳性率呈依次递减趋势。同时发现抗体阳性率具有季节性,冬、春、夏、秋四季抗体阳性率呈依次递减趋势, 其中冬、春两季哺乳仔猪抗体阳性率显著高于夏季(P<0.05),冬季保育猪的抗体阳性率显著高于其他季节(P< 0.05),推测夏季哺乳仔猪低阳性率是因产仔母猪的PCV2 抗体水平正处于波谷,冬季保育猪高阳性率可能与垂直传播或生后不久感染PCV2有关[1]。
2004年12月-2005年4月,温清萍等用ELISA法对自广东省东莞市26个镇(区)的74个猪场和16个屠宰场采集的1766份猪血清进行了PCV-2 ORF2蛋白抗体的血清学检测,结果发现猪场中场阳性率为62.16%(46/74),屠宰场中场阳性率为18.75%(3/16),样品平均阳性率为13.31%(235/1766)[2]。
2005年,赖立新用ELISA 法对自云南省龙岩市的5个县(区)10个猪场送检的315份血清进行了PCV2的血清学检测,发现场阳性率为80.0%(8/10),样品总阳性率为48.89%(154/315),种猪阳性率为69.3%(79/114),育肥猪阳性率为50.45%(56/111),仔猪阳性率为21.11%(19/90)。此外,还发现血清阳性率随猪的年龄增长而升高[3]。
2005年-2006年,王宪文等用ELISA法对自河南7个地区23个疑似PCV2感染发病猪场的318份猪血清进行了PCV2感染抗体检测,结果发现平均阳性率为34.59%(110/318),且发现哺乳仔猪、青年猪、后备母猪、经产母猪的阳性率分别为0%(0/40)、30.44%(28/92)、38.24%(39/102)、51.19%(43/84)[4]。
2006年1月-8月,周秋平等用ELISA法对自海南省海口、琼海、三亚、文昌、东方、琼中、定安、澄迈等8个市(县)采集的1274份猪血清进行了PCV2的抗体检测,结果发现总阳性率为28.65%(365/1274),其中被调查的2个规模化猪场感染率分别为42%和56%[5]。
2006年,祝卫国等应用ELISA法对自对陕西省7个不同地区收集的476份猪血清进行了PCV2抗体检测,结果样品平均阳性率为35.92%(171/476),并发现不同亚群猪中阳性率有差异:哺乳仔猪阳性率为2.27%(2/88),断奶仔猪阳性率为48.81%(41/84),肥育猪阳性率为49.37%(39/79),种公猪阳性率为16.13%(5/31),后备母猪阳性率为16.95%(20/118),经产母猪阳性率为57.5%(69/120) [6]。
2006年9月-2007年l0月,马增军等用ELISA方法对自河北、北京及天津地区22个不同场(户)猪群收集的的398份猪血清进行了PCV2抗体检测,结果发现场(户)阳性率为90.09%(20/22),样品平均阳性率为84.17%(335/398),其中种母猪阳性率为86.05%(74/86),种公猪阳性率为88.24%(15/17),育肥猪阳性率为86.58%(129/149),断奶仔猪80.14%(117/146)[7]。
2006年-2007年,金爱华等用ELISA法对来自上海、天津、浙江、福建、山东、河南、江苏7个省(市)的367 份猪血样进行了PCV2抗体检测,结果发现2006年5个省(市)中3个省(市)未检出阳性样品,场阳性率为46.15%(6/13),样品阳性率为10.23%(22/215);2007年5个省(市)中仅1个省未检出阳性,场阳性率90%(9/10),样品阳性率30.92%(47/152)。两年间7个省(市)中只有河南未检出阳性,计算23个场样品平均阳性率为18.80%(69/367)[8] 。
2006年-2010年,高利波用ELISA法对自云南省部分规模化猪场采集的2974份猪血清进行PCV2抗体检测,发现5年间PCV2抗体总阳性率为42.04%(1250/2974),依年次阳性率分别为11.29%(69/611)、17.11%(116/672)、88.42%(435/518)、49.72%(266/535)、53.37%(364/682),抗体阳性率有逐年上升趋势。此外,统计表明种猪阳性率高于商品猪,由此认为云南规模化猪群中存在较为严重的PCV2感染和流行[9]。
2007年,马德慧等用ELISA法对自内蒙古4个地区6个猪场采集的182份猪血清进行了PCV2抗体的检测, 发现平均阳性率为39.6%(72/182),其中母猪阳性率为44.9%(22/49),种公猪感染率为73.7%(14/19),生长育肥猪阳性率为38.8%(19/ 49),保育猪阳性率为40. 5%( 17/42)、哺乳仔猪阳性率为0%为阴性(0/35),由此认为内蒙古地区猪场存在较严重的PCV2感染[10]。
2007年,李金海等用ELISA法对四川省6个规模种猪场166份猪血清进行了PCV2抗体检测,结果发现场阳性率为100%(6/6),样品抗体平均阳性率为60.84%(101/166)[11] 。
2007年,欧阳素贞等用ELISA法对自河南省豫北地区4市收集的338份猪血清样品进行了PCV2抗体,结果发现平均阳性率为40.53%(137/338),其中经产母猪阳性率为552.73%(29/55),肥育猪阳性率为51.43%(36/70) ,断奶仔猪为45.3%(53/117,其中包括27头疑似症状病猪),后备母猪阳性率为20.59%(7/34),种公猪阳性率为为18.181%(4/22),哺乳仔猪为阳性率为16.0%(8/50)[12]。
2007年4月-2008年4月,李军等用ELISA法对自湖北省襄樊、十堰、随州、荆门等12市(县)47个规模化猪场(已经发病25家)采集的342份血样进行了PCV2 Cap蛋白的抗体检测,结果发现抗体平均阳性率为80.4%(275/342), 其中61份母猪血样中抗体阳性率为83.6%,281份肥猪血样中抗体阳性率为79.7%,因此认为鄂西北地区PCV2感染情况严重[13]。
2007年-2011年,徐廷川等用ELISA法对自广东部分地区收集的764份猪血清进行PCV2的抗体检测,结果发现PCV2的抗体平均阳性率为61.91%(473/764),其中断奶仔猪阳性率为59.52%(322/541),后备母猪阳性率为64.81%(35/54),经产母猪阳性率为67.29%(72/107),公猪阳性率为70.97%(22/31);与伪狂犬病毒混合感染的阳性率为14.71%(35/238),与蓝耳病病毒混合感染阳性率为47.48%(113/238),三者混合感染的阳性率为8.82%(21/238)。由此认为,广东地区猪群中普遍存在PCV2感染[14]。
2007年-2011 年,崔亚兰等用ELISA方法对自贵州省9个市( 州) 收集的4980份血清进行了PCV2抗体检测,并用PCR方法对19个猪场(或屠宰场)133份可疑病料(2011年)进行了病毒核酸的PCR检测,统计得出以下结论:(1) 贵州省9个市(州)的养猪场、屠宰场及不同生长阶段均可检出PCV2 抗体,平均阳性率为43.45% (2164/4980);(2)5年间抗体阳性率呈逐年上升趋势。(3)不同规模养殖场抗体阳性率由高到低依次是规模场、种畜场、散养户,且散养户与规模场、散养户与种畜场间差异显著(P<0.05)。(4)不同生长阶段抗体阳性率有差异,由高到低依次是:经产母猪(355/612,58.00%)、种公猪 (138/257,53.70%)、后备母猪(298/595,50.08%)、哺乳仔猪(145/434,33.41%)、断奶仔猪及育成猪(354 /910,27.91%)。(5)19个猪场共计133份可疑病料的核酸检测结果是:场阳性率为84.21%(16/19),样品阳性率为77.44%(103/133) [15]。
2008年,杨均等对自贵州省4个地区6个规模猪场收集的240份血清进行了与猪场繁殖障碍性疾病相关的6种病毒性疫病的血清学调查,其中包括用ELISA法对PCV2的检测,结果发现猪群中PCV2抗体平均阳性率32.5%(78/240),同时发现6个规模场存在PRRSV和PCV2混合感染现象[16]。
2008年1月-2010年9月,赵津等用ELISA法对自华东地区5个省(市)及河南省的68个规模化猪场收集的1017份猪血清样品进行了PCV2抗体水平检测,结果发现平均阳性率为59.88%(609/1017),依年次分别为53.4%(102/191)、35.33%(124/351)、80.63%(383/475),且发现成年猪阳性率最高(81.40%、245/301),保育猪阳性率最低为(41.48%、56/135),哺乳仔猪和育肥猪阳性率相近,分别为57.95%(113/195)和52.20%(107/205),推测仔猪断奶后随母源抗体逐渐降低,以后感染病原则阳性率重新,故在不同生长阶段阳性率有差异[17]。
2009年12月,尹德明等应用ELISA法对某县6个生猪供精站的54份公猪血清样品PCV2血清抗体检测,结果发现6个生猪供精站的公猪均存在PCV-2 感染,平均阳性率为77.78%(42/54),且在杜洛克、长白、大约克三个品种中均检出阳性公猪。阳性率分别为66.68%、77.78 %、85.71 %[18]。
2009年,焦凤超等用ELISA法对自河南省3个地区20个中小规模猪场收集的300份血清样品进行了PCV2抗体检测,同时应用PCR法对收集的具有呼吸道症状和慢性消耗性症状病猪的组织进行了PCV2核酸检测,结果发现场阳性率为75%(15/20),抗体阳性率为21.67%(65/300),核酸检测场阳性率为75%(15/20),样品平均阳性率为68.42(13/19)[19]。
2010年,金明兰等用ELISA法对自长春、吉林、四平、通化、延吉5个地(市)7 个种猪场收集的258份猪血清进行了PCV2抗体检测,结果发现母猪群平均阳性率为51.9%(134/258),经产母猪阳性率为68.1%(96/141),后备猪阳性率为32.5%(38/117)[20]。
2010年10月-2011年6月,卢寄军等用ELIAS法对湖南省8个地区的猪场中随机抽取的526份猪血样进行了检测,结果发现抗体平均阳性率为57.41%(302/526)。其中母猪阳性率为72.4%(68/94),公猪阳性率为51.92%(27/52),育肥猪阳性率为61.46%(118/192),仔猪阳性率为47.34%(89/188)。因此认为PCV2在湖南省猪群已经普遍存在[21]。
2011年1月-2011年5月,杨俊等用ELISA法对自湖南省茶陵、郴州、桃源、南县、望城和攸县内6个规模猪场采集的315 份血样进行了PCV2的抗体检测,结果发现:猪群平均阳性率为95.24%(300/315),其中经产母猪群、后备母猪群、哺乳仔猪群、保育仔猪群的抗体阳性率分别为96.33%(236/245)、97.62%(41/42)、100%(17/17)和54.45%(6/11)。因此认为湖南省规模猪场的各阶段猪群中普遍存在PCV2感染,且大部分抗体阴性保育仔猪群存在感染发病的风险[22]。
2012年,李超等应用ELISA法对自安徽省14个地(市)收集的468份血清样品进行了PCV2抗体检测,结果发现平均阳性率为74.36%(140/468)、哺乳仔猪阳性率49.0%(25/51)、断奶后仔猪阳性率55.56%(40/72)、60日龄以上猪群阳性率64.71%(11/17),阳性率随猪日龄增长而升高。 同时,应用PCR与ELISA同步对95份血清样品和63份组织样品(共计158份)进行检测结果的比较试验发现,PCR与ELISA检测结果的符合率为99.37%。统计发现皖南地区的阳性检出率明显高于淮北和江淮两个地区,即PCV2感染的猪群存在日龄及地区差异性。最终认为安徽省猪群中普遍存在PCV2的感染,病毒血症与抗体共存现象显著[23]。
1.2 疑似病猪PCV2病原学检测情况
2003年9月-2005年5月,张治涛等用PCR法对自上海、江苏、浙江、山东、安徽、江西和广西等省市193家猪场的389份具有呼吸道及慢性消耗症状的仔猪或育肥猪进行了针对PCV2 ORF2基因序列的核酸检测,结果发现场阳性率为18.00%(33/193),样品平均阳性率为9.00%(35/389),且发现猪群中存在该病原与猪繁殖与呼吸综合征病毒混合现象,样品阳性率高低与季节性(春夏季节阳性率明显高于秋冬)、地域性、日龄大小(仔猪7~8周龄发病率最高)等因素有关[24]。
2005年-2006年, 聂立欣等PCR法对广东省12个市(县/区)40个猪场的108头病猪进行了PCV2的核酸检测。结果发现平均阳性率为40.74%(44/108),从10日龄-120日龄均有感染,以60日龄-70日龄阳性率高,且存在与蓝耳病病毒、胸膜肺炎放线杆菌等多种病原混合感染现象[25]。
2006年1月-2007年6月,曹正用PCR法对自江苏省9市15个规模化猪场中收集的186份疑似PCV2感染发病猪组织病料(脾、肺、淋巴结)进行了PCV2检测,结果发现PCV2平均阳性率为63.44%(118/186),由此认为江苏省规模化猪场猪群中普遍存在PCV2 感染[26]。
2007年,李郁等应用PCR技术对自安徽省3个猪场采集的30头发病仔猪组织(脾、肺、肾、淋巴结)进行了PCV2检测,结果发现平均阳性率为36.67%(11/30),且发现病原主要感染部位为脾和淋巴结[27]。
2007年,孙丽华等用套式PCR法对广东地区的10个猪场送检的144份猪血清样品进行了PCV1和PCV2的检测,结果发现场阳性率为100%(10/10),PCV1样品阳性率为14.6%(21/144),PCV2阳性率为27.8%(40/144),PCV1、PCV2样品同时阳性率为4.9%(7/144),且发现各猪场感染率有差异,由此认为华南地区PCV1和PCV2的感染比较普遍[28]。
2007年,李文杰等用复合PCR法对自江苏地区的采集的162份可疑病料进行了PCV的检测,结果发现PCV2阳性率为44.44%(72/162)、PCV1阳性率为10.49%(17/162)、PCV1和PCV2同时感染阳性率为4.32(7/162)。从发病时间看,以9-11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.12%。通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。同时对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行PCV2检测,结果有7头PCV2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其他受检脏器更适合作为PCV2的检测样品[29]。
2007年-2012年,吴瑗等用PCR法对自浙江省及周边地区共4个省份的180份临床疑似病例中所取得的病料进行了PCV2的核酸检测,结果发现浙江省及周边地区PCV2在猪群中的阳性率依次为4.17%、52.0%、44.1%、37.0%、40.5%和33.3%,总阳性率41.1%(74/180),与以往报道相比其感染率基本持平。此外,对随机选取的45份阳性病料进行了全基因组扩增及测序,依据Olvera 等(2007)按Group 1(PCV2b)与Group 2(PCV2a)两组、分别对应8个分支(1A-1C 和2A-2E)的分类法进行序列遗传进化分析发现:45个毒株均属于Group1(PCV2b),是浙江省及周边地区PCV2 的主导基因型,其中11个毒株(占23.9%)属1A分支、10个毒株(占21.7%)属1B分支、22个毒株(占47.8%)属1C分支,且发现1C分支从无到有,在其中的比例也越来赿高,并逐步占据主导地位[30]。
2007年-2008 年,彭志锋等用PCR法对自河南省45个规模化猪场收集的361份疑似PCV2感染猪的淋巴结和脾脏进行了检测,结果平均阳性率为70.9%(256/361);统计发现一年中哺乳仔猪、保育猪、育肥猪各亚群阳性率依次呈递增趋势;而猪群抗体阳性率与季节变化相关,冬春多发,冬季阳性率最高[31]。
2008年4月-2009年6月,冉懋韬等用PCR法对自贵州省收集的137份疑似PCV2感染发病猪组织进行了针对PCV2 ORF2基因的核酸检测,结果发现平均阳性率为56.2%(77/137)77份,阳性率为56.20%,推测PCV2普遍感染贵州省内猪群[32]。
2008年,杨先进等用PCR(或RT-PCR法)法对自长江中下游地区7省市24个规模化猪场患繁殖障碍病猪收集的病料进行了6种病毒性疫病病原的核酸检测,其中包括针对PCV2 ORF2基因的检测,结果发现平均阳性率为39.37%(50/127),且发现长江中下游地区规模化猪场的猪群普遍存在蓝耳病病毒、细小病毒、伪狂犬病毒、乙脑病毒混合感染现象[33]。
2008年-2011年,李玲等对自福建、江西、广东、安徽、浙江、河南、河北、广西、内蒙古、上海、江苏和山西共计12个省(市、区)收集的452份健康猪群和发病猪群样品进行了PCV2 ORF2基因(编码病毒主要免疫原性衣壳蛋白)的核酸检测,结果发现样品阳性率为78.3%(354/452)。对其中南方5省的31株ORF2基因序列分析和比对结果发现:31株PCV2均属2b基因型,其中21株归类于1A/1B基因亚群,另外10株归类于1C基因亚群;对ORF2基因编码的氨基酸序列比对分析表明病毒基因亚型有其特异性氨基酸变异位点。从而认为尽管自2008年以来国内以1A/1B亚群为主导的流行致病株,但1C亚群毒株从无到有并有逐渐增多趋势,这种是值得关注的[34]。
2009年,韩雪等用PCR法对来自国内28个省市、71个中小规模场、22个屠宰场和62家散养户采集的2905份猪血清样品进行了PCV2的检测,结果发现被检血清平均阳性率为14.8%(429/2905);场阳性率分别是:屠宰场为86.4%、中小规模场为52.1%、散养户为58.1%;对5个年龄组统计发现:2-4周龄组未检出阳性,5周龄以上各组均检出阳性,其中11-14周龄组、15-26周龄组阳性率高于5-7周龄组、8-10周龄组。因此认为国内猪群广泛感染PCV2[35]。
2009年,焦凤超等用ELISA法对自河南省3个地区20个中小规模猪场收集的300份血清样品进行了PCV2抗体检测,同时应用PCR法对收集的具有呼吸道症状和慢性消耗性症状病猪的组织进行了PCV2核酸检测,结果发现场血清检测阳性率为75%(15/20)、抗体阳性率为21.67%(65/300),核酸检测场阳性率为75%(15/20)、样品平均阳性率为68.42(13/19)[19]。
2008年-2010年,徐君等用PCR法对自从四川省21个规模化猪场收集的273份样品进行PCV2的病原核酸检测,结果发现场阳性率为14.29%(3/21)、样品平均阳性率为52.38%(143/273),统计表明PCV2感染随猪龄的增长而升高,同时发现有该病原与细小病毒混合感染现象(场阳性率28.57%、6/21;样品阳性率10.62%、29/273)[36]。
2009年-2010年,王小敏等用PCR法对自江苏、安徽、上海、山东、浙江、福建、江西7个省采集的227份发病猪群病料(血液、脾脏、淋巴结等)进行PCV2检测,发现PCV2a 阳性率为15.86%(36/227)份、PCV2b阳性率为44.5%(101/227)份、PCV2a和PCV2b 同时存在于样品中的阳性率为10.13%(23/227),总阳性率为60.35%(137/227)。此外,还发现猪群中PCV2和蓝耳病病毒混合感染比较普遍[37]。
2010年1月-2011年8月,梁鹏帅等用套式PCR对自华南地区11个规模化猪场采集的807份猪血清进行了PCV1和PCV2的检测,结果发现PCV2场阳性率为100%(11/11),PCV1场阳性率为45.5%(5/11),PCV2平均阳性率为30.61%(247/807),PCV1平均阳性率为4.21(34/807),且发现各场内猪群PCV2阳性率在15.83%~43.33%间不等,各场内猪群PCV1阳性率在5.47%~23.52%间不等。此外,在对从其他不同猪场采集到的312份有咳嗽、喘气、消瘦及疑似断奶后多系统消耗综合征症状猪的血清、104份无临床症状猪的血清检测中,结果发现:在病猪血清中检测到PCV2阳性率为58.65%(183/312)、蓝耳病病毒阳性率为37.83%(118/312,RT-PCR法)、PCV2和蓝耳病病毒同时阳性率为23.40%(70/312),而无症状猪血清中PCV2阳性率为27.88%(29/104)、蓝耳病病毒阳性率为0.96%(1/104,RT-PCR法)、PCV2和蓝耳病病毒同时阳性率为0%(0/104)。进一步调查得出结论,PCV尤其是PCV2在华南地区广泛流行,且与蓝耳病病毒混合感染致病情况较多;种猪带毒率高;猪群中PCV2感染率高低具有季节相关性,冬春季节阳性率高[35]。
2011年9-12月,薛云等用PCR法对自河南省不同地区收集的具有呼吸道症状的822份猪肺脏等组织进行了针对PCV2 ORF2基因序列有核酸检测,结果发现平均阳性率为62.53%(514/822),同时可自69.2%(144/822)的阳性样品中分离到链球菌、猪副嗜血杆菌、大肠杆菌或多杀性巴氏杆菌等共感染菌,从而认为河南省10多个地区的猪群普遍感染了PCV2,且存在严重的与病原菌的共感染情况[39]。
2011年-2012 年,师保浚等用PCR法对来自江苏省和安徽省部分县( 市)、存栏母猪数在300~1000头间规模化养猪场发病猪的1132份组织病料进行了病原学调查,结果发现PCV2 阳性率为37.1%(420/1132),认为PCV2 感染加重了哺乳仔猪腹泻的流行[40]。
2 结论
2.1 国内各地猪群普遍感染PCV2
略………………
本部分内容请查看《中国动物保健》杂志2014年2月刊
参考文献
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本文精简版刊于本刊2014年2月刊
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