山楂提取物对雄性小鼠生殖细胞突变抑制作用的研究
黄文文
（西南大学药学院药用资源研究所重庆400716)
摘要：本实验研究山楂提取物对小鼠生殖细胞突变作用的影响，结果表明山楂提取物对雄性小鼠生殖细胞不具有致突变作用，并且对小鼠生殖细胞有一定保护作用。
关键词：山楂提取物；雄性小鼠；生殖细胞
TheInhibitionaboutHawthornFruitExtracttoGerminalMutationofmalemice
Abstract:ThestudyisabouttheinhibitionaboutHawthornFruitextracttogerminalmutationofmice.Theresultssuggestthathawthornfruitextractdonothaveamutageniceffectonmalereproductivecells，whilealwaysprotectthem.
Keywords:HawthornFruitextract;malemice;germcell.
山楂（CrataeguspinnatifidaBge.）属于药食两用植物，根据有关文献资料[1]报道及成分分析，未发现有毒有害物质，对人体健康不致构成损害。用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，淤血经闭，产后淤阻，心腹刺痛，疝气疼痛，高脂血症，同时可抑制精子突变[2]。本实验采用注射环磷酰胺(CP)的小鼠作对照[3]，研究山楂提取物对小鼠生殖细胞的作用。
1.材料和方法
1.1仪器与试药
山楂提取物（中试产品）；清洁级昆明小鼠50只（由重庆市中药研究院提供）；小牛血清（中美合资兰州民海生物工程有限公司）；环磷酰胺（上海华联制药有限公司）；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、水溶性伊红等。
1.2动物分组及剂量设计
取健康成年雄性昆明小鼠（20±2g）50只，随机分为5个组，每组10只，设正常对照组、阳性对照组（环磷酰胺60mg/Kg·BW）和高剂量（10g/Kg·BW）、中剂量（5g/Kg·BW）、低剂量（2g/Kg·BW）三个剂量组[3]。
1.3实验处理
按设计剂量给高、中、低三个剂量组动物灌胃山楂提取物水溶液，阳性对照组经口给予环磷酰胺（60mg/Kg·BW），正常对照组给予溶剂蒸馏水，连续5天。于首次给受试物后的第35天处死动物。
1.4标本制作
用颈椎脱臼法处死小鼠，取出两侧副睾，放入盛有约2mL生理盐水的平皿中。用剪刀将副睾纵向剪1～2刀，静置3～5min，轻轻摇动。用四层擦镜纸过滤，吸滤液涂片。空气干燥后，用甲醇固定5min，再用1.5％伊红染色1h，用水轻冲，干燥后阅片。
1.5阅片
在低倍镜下找到背景清晰、精子重叠较少的部位，用高倍镜顺序检查精子形态，计数结构完整精子。精子有头无尾（轮廓不清）、头部与其它精子或碎片重叠，或明显是人为剪碎者，均不计算，每只动物检查1000个精子。精子无钩、香蕉形、胖头、无定形、尾折叠、双头和双尾等均视为畸形。
2.结果与结论
山楂提取物对小鼠精子的影响结果见表1。
表1山楂提取物对小鼠精子畸形的影响
组别
剂量
（g/Kg·BW）
动物数
（个）
观察精子数
（个）
畸形精子数
（个）
精子畸形率
（%）
正常对照
/
10
10000
327±23
3.27±0.23
阳性对照
0.06(PC)
10
10000
1895±161
18.95±1.61
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