应用实时荧光定量PCR技术对一例猪瘟的诊断报告

猪瘟(Hog Cholera, HC),又称古典猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)是一种高度接触性传染的病毒病,由黄病毒科,瘟病毒属的猪瘟病毒(HCV或CSFV)引起,于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。中国是猪瘟流行较严重的国家之一,近些年因多种疾病死亡生猪占养猪总数的8%~10%,其中1/3由HC致死,每年的直接经济损失在20亿元人民币左右。由于HC的存在,生猪及其产品只能自产自销,不能出口,几十年来,失去国际市场所带来的经济损失无法计算。  近日在锦州市周边一存栏200头的猪场,突然有80日龄左右的3头育肥猪出现厌食,精神不振,高热达40℃的临床症状,于2天后死亡。死猪剖检后可视粘膜和皮肤有针尖大小密集出血点。我们及时对病死猪采集了3份组织病料,对同群未发病猪采集3份鼻拭子,进行猪瘟的病原学检测。
  1材料与方法
  1.1病料 在病猪死后2小时内无菌采集3份扁桃体、肝脏、脾脏、肺脏和淋巴结,及3份健康猪的鼻拭子,及时进行冷冻保存。将每头猪的组织病料混合后进行研磨后备用,鼻拭子可以直接用于实验。  1.2主要试剂 猪瘟病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法),购自中山大学达安基因股份有限公司;氯仿购自天津化学试剂有限公司;异丙醇购自天津化学试剂有限公司。  1.3主要仪器 II级生物安全柜(NU-437-400E,美国NuAire)荧光定量PCR(IQ5,美国伯乐);台式低温冷冻离心机(ST16R,德国贺利氏)。  1.4实验方法 严格按照猪瘟病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的说明书进行。
  2 结果 见图1-1

  从图1-1中可以看出,病死猪的3份样品均为阳性,健康猪全为阴性。说明病死猪患有猪瘟。
  
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原创文章,作者:刘 少娟,如若转载,请注明出处:http://zgdwbj.com/archives/11042

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