绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)也称为铜绿假单胞菌,1882 年Gersard首先从伤口脓液分离得到[1]。绿脓杆菌在自然界广泛存在,主要分布于土壤、水和空气中,也存在于正常人和动物的肠道和皮肤中,是一种条件性致病菌[2]。绿脓杆菌病是一种以败血症和化脓性肺炎为主要临床症状的人兽共患传染病。在兽医临床上,由该菌能引起马的流产和化脓性肺炎,牛的下痢、乳腺炎、子宫炎及流产、母狐的流产、犬的角膜炎、蛇的坏死性口炎、雏鸡的败血症等。在人医临床上,绿脓杆菌为医院常见感染菌,能引起术后和伤口的感染,以及人的肺炎、胸膜炎、脑膜炎等疾病[3]。在公共卫生领域,绿脓杆菌的毒素残留还能引起食物中毒[4],该菌对奶、蛋、肉制品的污染已经引起人们的关注[5-6]。 2012年12月广西南宁市某竹鼠养殖场饲养的竹鼠突然发病,症状表现为精神沉郁、不进食不饮水、拉稀,2~3天后口鼻流血死亡。病理剖检可见肺苍白,肝有白色坏死点,脾脏肿大,肾有黄色坏死点,肠系膜淋巴结肿大出血,肠道粘膜充血,肠道充满气体。无菌取病鼠心、肺、肝、脾脏进行细菌分离。根据发病临床症状,病理变化及病原分离鉴定及致病性试验结果,确诊为绿脓杆菌感染。对分离菌进行体外药敏试验,为兽医临床上科学防治该病提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 实验动物 广西南宁某竹鼠养殖场送检的2只病竹鼠。NIH 小鼠( 购自广西医科大学实验动物中心) 。1.2主要试剂 营养琼脂培养基、麦康凯培养基、MHA培养基购自北京陆桥技术公司;兔血琼脂平板为自制。革兰氏染液、微量生化反应管、抗生素药敏试纸购自杭州天和微生物试剂有限公司。购自杭州天和微生物试剂有限公司。细菌基因组DNA提取试剂盒、2×Taq PCR Master Mix、DNA标准Marker,购自天根生化科技(北京)有限公司;细菌16S rRNA扩增引物1492R:5'- GGCTACCTTGTTACGACTT-3'和27F:5'- AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'由上海英骏生物技术有限公司合成。1.3 细菌分离和形态学观察 无菌取病鼠心、肺、肝、脾分别划线接种于营养琼脂平板、兔血液琼脂平板和麦康凯平板上,置于37℃恒温培养箱中培养18h~24h,挑取可疑菌落进行纯培养,挑单个菌落涂片、革兰氏染色、镜检。1.4 生化试验
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本文全文刊于本杂志2013年5月刊,可从知网下载或向本刊订阅。
原创文章,作者:刘 少娟,如若转载,请注明出处:http://zgdwbj.com/archives/10671