青霉素类兽药的作用机理是干扰细菌细胞壁的合成，而细胞壁的合成发生于细菌的繁殖期，青霉素类兽药对繁殖期的细菌具有杀灭作用，故称青霉素类兽药为繁殖期杀菌药。青霉素类兽药在临床上使用非常广泛，如果使用不当，不仅起不到治疗作用，而且易延误病情，甚至造成不必要的经济损失。
合理使用青霉素类兽药
严格掌握用药范围青霉素G对大多数革兰氏阳性菌引起的疾病，如呼吸系统感染、猪丹毒、炭疽、败血症等有很好的疗效，对各种螺旋体和放线菌都有强大的抗菌作用。苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、苄青霉素则对耐青霉素G的金黄色葡萄球菌所致的呼吸道感染、乳腺炎、创伤感染及败血症等有可靠的疗效。
选择适宜的给药途径绝大部分青霉素类兽药对耐酸不稳定，内服易被胃酸和消化酶破坏，故内服效果差或无效。青霉素类兽药最适宜的给药途径是进行肌肉注射，肌注后吸收快且完全，疗效确切。
临床应用时的注意事项
注意过敏反应青霉素类兽药用于动物机体一般无不良反应，但对个别家畜偶见有过敏反应，严重者可产生过敏性休克。易过敏家畜中以马、骡、猪、犬等多见，注射后不久出现流汗、兴奋不安、肌肉震颤、心跳加快、呼吸困难、站立不稳、抽搐等症状。因此，在用药过程中应注意观察，如出现过敏反应，应立即停止用药，同时，用肾上腺素或地塞米松进行抢救。
青霉素钾盐不宜静脉注射，宜进行肌肉注射 在使用青霉素钾盐时还应注意动物的血钾变化，一般禁止大量使用，特别对高血钾患畜禁用。
青霉素类兽药不宜空腹注射以免患畜因血糖较低而引起昏厥。
不应随意加大剂量大剂量或超大剂量使用青霉素类兽药，可干扰凝血机制而造成出血或引起中枢神经系统中毒，引起动物抽搐、大小便失禁、甚至瘫痪等症状，也可使耐药菌株迅速诱导产生分解青霉素的β-内酰胺酶。所以在兽医临床上应严格掌握正确的使用方法和剂量。
青霉素类兽药应即溶即用由于青霉素类药物的水溶液不稳定，在室温下溶解的时间越长，其效价就越低，分解产物也就越多，致敏物质不断增加。所以应做到即溶即用，以确保药效，减少毒副作用。
注意配伍禁忌磺胺类钠盐与青霉素混合，会使青霉素失效，青霉素与庆大霉素合用，会使庆大霉素失效；青霉素不能与四环素、碳酸氢钠、维生素C、阿托品、氯丙嗪等混合使用，否则失效。
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