ASF的任何实验室检测都始于样品采集。样品采集过程中重要的考虑因素是调查的目的，例如诊断、监测或无疫认证。对哪些动物采样将取决于抽样的目的。例如，当调查疫情爆发(被动监测)时，应对针对患病和死亡动物，而在检查动物是否暴露于病原(主动监测)时，应对年龄最大的动物进行抽样。负责抽样(并进行临床检查)的人员在开展相关操作前应该接受过保定猪的技术培训(包括临床检查和取样)。
采样小组应根据采样动物的数量准备充足的采样设备(见插文4)，并包含可能由于其他原因(例如，失效的真空采血管)而丢失或不可用的材料数量。另外，数据收集、个人防护/生物安全和样品运输的物品必须包装(参见插文4中的“样品运输材料”)。
建议准备一份现场采样表格，以便将现场收集所有样品和相关信息统计到一起。如果预期将样品提交给区域/国际参考实验室，建议一式两份取样，以便对提交的样品进行留样，避免在反复冻融/分割样品。
取样应小心谨慎，并按照适当的方法避免对动物造成过度的应激或伤害，或对采样人员造成伤害。应无菌收集并注意避免交叉污染，并始终使用新的针头以避免疫病传播。所有等待检测的样品都应该被认为有感染性并应进行相应处理。养殖场使用的所有采样材料应按照当地法规进行安全处理，例如，装袋并运送回实验室进行高压灭菌/适当处置。
提交到诊断实验室的相关样品应有清晰且保存持久的标签，样品质量良好。
使用含有抗凝血剂(EDTA-紫色盖)的无菌管(真空采血管)从颈静脉、下腔静脉或耳静脉抽取全血。如果动物已经死亡，可以从心脏中采血，但必须立即进行。非洲猪瘟 使用未加抗凝剂(红色盖子)的真空采血管从颈静脉、下腔静脉、耳缘静脉，或剖检过程收集血液样品。返回实验室后，血液样品应在4士3C下放置14-18小时以分离血凝块(译者:此处与我国实际操作不同，仅供参考)。弃去凝固物，并离心10-15分钟后，回收澄清的.上清液(血清)。如果血清是红色，这表明样品发生了溶血，可以在酶联免疫吸附试验(ELISA)中产生假阳性反应。通常已经死亡动物的血液样品易发生溶血(例如野猪)。血清样品在分离后可以立即开展抗体和病毒检测，或者在<-70°C下储存备用。对于抗体检测，储存在-20C已足够，但是对于病毒检测，最好存于更低温度。 虽然所有的猪器官和组织都可以用来检查ASFV的存在(主要是该病的急性和亚急性的形式)，但目标器官是脾脏、淋巴结、肝脏、扁桃体、心脏、肺和肾脏。其中，脾脏和淋巴结是最重要的，因为通常它们的病毒含量是最高的。骨髓也可用于死亡野生动物病例，因为如果动物已经死了- -段时间，则骨髓可能是唯一相对保存完好的组织。可以通过关节内组织液以检查低毒力毒株的存在。建议将样品保持在4C，尽快(48小时内)提交给实验室。如果由于物流原因无法保障的，样品可以储存在冷库或液氮中。对于组织病理学研究，也可以同时提交用10%缓冲福尔马林浸泡的样品。虽然这些样品不能用于进一步的病毒分 离研究，但可用于PCR反应和免疫组织化学试验。通过PCR反应、病毒分离和/或抗原检测ELISA的方法进行病毒检测时，需要将样品用磷酸盐缓冲液制备成10%(w/V)的均质组织悬液。在离心后，建议对上层清液进行过滤，并用0.1%的抗生素在4士3°C处理1小时。经过匀浆处理组织可以立即用于ASFV病毒和/或核酸的检测，或存储在< -70°C备用。对于PCR反应，建议对10倍稀释样品或上清进行检测的同时，对未稀释样品也进行检测。从脾脏、肝脏和肺等脏器中提取的渗出物对于使用免疫过氧化物酶试验(IPT)和间接荧光抗体试验(IFA)方法检测抗体非常有用(Gallardo,2015)。
钝缘蜱属软蜱可以用于检测ASFV和病毒基因组。可从疣猪的洞穴、裂缝/洞穴中收集蜱虫，有时也可以从猪圈内的啮齿类动物的洞穴中收集。不同种类的蜱会有不同偏好的场所和栖息地。有三种收集技术:手动收集、二氧化碳诱捕和真空吸引捕捉。收集后，应让蜱保持存活或直接储存在液氮中，以确保蜱内病毒的保存完好，并避免DNA降解。 为了获得正确的诊断，必须在适当的温度下、以最快的速度正确采集样品。仔细进行包装、做好标记并送到实验室。ASF的诊断紧急，样品必须通过最直接的路线送到最近的有资质的实验室。样品必须附有一份提交表格，具体说明样品的数量和类型、种类、采样地点(根据具体情况填写地址、县、区、省、来源国家等信息)。此外，还列出了所需要的检测项目、提交样品人的姓名，以及观察到的临床症状、病变、发病率、死亡率、受影响动物的数量、历史和动物种类。如果是家畜，应该标注养殖场的所有者、养殖场的名称和饲养模式，再加上需进行的鉴别诊断项目列表。每个样品应能对应到来源动物。填写信息最低要求可能因实验室而异。采样之前打电话给实验室,有助于确保遵循正确的提交程序，以保证所送样品的数量能在一定时间内能够 完成分析及储存。样品应尽快到达检测实验室，以避免变质并确保最佳效果。应该保障运输过程中的安全，以免在运输途中感染其他动物或人，并避免污染样品本身。运送的样品必须有足够数量的冷却材料，例如冰袋，以防止变质。如果样品状况不佳，则无法做出准确的诊断。
将样品运送到最近的实验室时，即使样品由兽医服务人员携带，也必须遵守国家规定。对欧洲来说，基本规则是《欧洲关于道路危险货物运输协定》(ADR)。 这些样品应该按照规定3运输，并使用“三重包装系统”。特别是如果样品通过空运运输，发货人必须遵守国际航空运输协会(IATA) 的《危险品条例(DGR)》，包装应符合《危险品条例(DGR)》中的第650*条包装说明。非洲猪瘟的诊断样品被认为是危险的一必 须被包装，并正确标记，以防止病毒的泄漏。因此，应使用满足规格的产品(即符合国际航空运输协会(IATA)运输诊断样品的要求，如95KPa压力测试，跌落试验)。 要寻找该类型容器和包装的供应商，请在互联网搜索关键字，如“95 KPa”和“UN3373”、“瓶”、“管”、“袋子”，则通常会找到适当的信息。
样品应该储存在防漏、防水、无菌的容器中(这些应该是主要的容器)，如图27所示。每个主要容器不得超过1升。每个容器的盖子应用胶带或石蜡膜密封。这些密封的主要容器应该是用减震/吸收材料单独包装，以吸收容器或管子任何可能的泄漏，并防止冲击。必须用防水墨水标记每个容器，以明确识别来自于哪只动物。 所有这些主容器应放置在二次防漏、密封、防水的容器中，材质可以为塑料或金属。二次包装必须能够承受-40C至55*C的温度范围，耐受95 KPa (0.95 bar)的内部压力，且无泄漏。吸收材料也应放置在二次容器内。如果将多个易碎的主容器放置在单个二次容器中，则必须单独包装或分离，以防止相互接触。 1)由于存在发生爆炸的危险，请勿将干冰放入主容器或二次容器内。2)主要容器必须能够承受-40C至55C的温度范围”，耐受95 KPa (0.95 bar)的内部压力，且无泄漏。
二次容器必须确保用合适的缓冲材料外包装。应该已经成功地通过了在1.2米的高度的跌落测试，并标有UN3373标记。外包装在盛装液体的情况下不得超过4升，在固体物质的情况下不得超过4公斤。当冷藏样品时，不包括冰、干冰或液氮的重量。 样品必须在4’c温度运送，通常为短期运输(1-2 天) 如上所述进行包装，如果空运， 应根据国际原子能机构(IAEA) 包装规范650，将样品与制冷剂(足够的数量以保持所需的温度)放置在隔热、坚固的箱子进行运输。 对于超过三天以上的运输:这些材料也应按指定的方式包装，并在隔热箱中添加足够的干冰以保持温度。确保二次包装在箱子的中心是固定的，这一-点很重要，因为当干冰分解的时候，二次容器会松动。由干冰分解产生的二氧化碳气体(CO2)降低PH值并使病毒灭活:因此，所有主要和二次容器必须密封。当干冰被用来在运输过程中冷藏样品时，外部包装必须允许释放气体(即不能密封)以防止压力的积聚，从而破坏包装。切勿冻结全血或含凝血剂的血清。 箱体外部(刚性外包装)5应标有以下标识: 运往实验室的样品必须附有该实验室提供的申请表格，或者，如果不能提供，则提供附信。该信件应包括有关动物所有人、养殖场名称、养殖场的所在地、饲养模式、涉及动物、病史、临床体征和死后病变的相关信息。必须注明所需的检测项目。运输单据：如果跨国境运输，需要进口或出口许可证，以及实验室接受传染性物质诊断许可证的副本等(有时需要)。这些要求因国家而异。询问接收方实验室进口诊断样品是否需要上述相关文件。
在运输样品前，请尽早与接收实验室联系并通知其有关预期的装运，包括详细信息和大致的到达日期和时间。最好是安排送货上门服务，直接送到实验室。一旦派送样品， 快递员应向目的地实验室提供其公司名称，如果有的话，应提供货物的跟踪号码和/或空运单号。如果使用空运，有必要与接收实验室事先安排，在抵达机场时接收货物(- -些国际实验室有该系统，但也不是全部都有)。必须告知接收实验室航空公司的名称、航班号和航空运单号。严禁人员将传染性物质放入托运或手提行李中，严禁随身携带传染性物质。 分离/培养的ASF病毒必须按照A类感染性物质运输。联合国的编号是UN2900，正确的运输名称是“感染动物的传染性物质(非洲猪瘟病毒)”，并符合第620号包装要求。箱子外面的标签和标记也是不同的。《危险品条例》要求所有参与运输的人员进行适当的培训，特别是对A类具有传染性的物质的运输，人员必须按照相应的要求进行培训，包括参加批准的课程、通过考核和获得认证(有效期为两年)。有关更多信息，请参阅《世卫组织传染病运输条例指南》。
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