2017年中科基因对河南、湖南、四川等主要养殖地区送检的猪群样品进行了猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪伪狂犬（PR）和猪O型口蹄疫（FMD-O）等常发疫病的免疫效果评估、感染状况监测和（或）疫病检测诊断。结果显示，除PR外，其它几种病原的抗体阳性率均在70%以上；送检样品PRV野毒感染血清学阳性率达到77%，而CSFＶ和PRRSＶ的抗体水平处于相对稳定的状态；从疫病的检测诊断的案例看，PRV和PEDV等病毒性病原以及葡萄球菌和副猪嗜血杆菌等细菌性病原的危害较大。以上结果可为我国猪群常发疫病的防控提供参考。 2017年我们共检测猪瘟（CSF）抗体18510份、猪伪狂犬病（PR）gE抗体18783份、gB抗体15456份、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）抗体20331份、猪O型口蹄疫（FMD-O）抗体3870份。下面对检测结果做一简要统计与分析。 汇总后的CSF抗体检测结果显示，各阶段猪群的抗体阳性率均在70%以上，总体阳性率为87.5%，免疫效果良好（表1）。但检测中发现个别猪群在猪瘟疫苗首免时，母源抗体偏高，阻断率多数在70%以上，导致免疫后抗体不升反降。对这些猪群调整免疫程序，待抽检猪只抗体一半阳（阻断率不高于70%）、一半阴，或80%以上猪只阻断率降至50%～60%时进行猪瘟疫苗首免，后续跟踪二免后一个月猪群阳性率即可达到70%以上。说明猪群需根据母源抗体水平确定首免时间，以确保猪瘟疫苗的免疫效果。表1 2017年猪瘟抗体检测结果
从2011年至2016年中国动物疫病预防控制中心的监测数据看，重点监测的100家原种猪场，gE场阳性率由64.3%下降到13.7%，个体平均阳性率由17.8%下降到13.7%。而我们2017年PRV gE抗体检测场阳性率为77.0%，个体平均阳性率为43.3%（表2和表3），其中个别阳性种猪场的个体阳性率超过60%，表明PRV野毒感染在部分猪群中仍比较严重。在原种猪场gE抗体阳性率逐渐下降的情况下，种猪场与商品猪场gE抗体阳性率仍居较高水平，提示引种企业在引进PRV阴性种猪前后，需做好本场的净化维持工作，尤其是后备种猪，必须逐头检测，剔除阳性猪，不能留作种用。根据我公司的监测结果，辽宁、吉林和福建等地多个种猪场采用该法维持了引进阴性种猪群的伪狂犬阴性状态。表2 2017年检测PRV gE阳性场分布情况
表3 2017年不同阶段猪群PRV gE抗体检测结果 通过对在售PRV gB抗体检测试剂盒的评价，我们在检测中采用了与攻毒保护效果相关性良好的试剂盒（购自普莱柯万泰公司和荷兰BioChek公司）对样品进行PRV gB抗体检测。结果表明，2017年PRV gB抗体平均阳性率为83.6%，总体水平较高，但在保育和育肥阶段，抗体阳性率为60%左右，不尽如人意（表4）。
表4 2017年不同阶段猪群PRV gB抗体检测结果
对使用两种试剂盒检测的结果分别进行统计，总体阳性率均在80%以上，总体效果较好；其中对于不同阶段的商品猪，抗体阳性率均呈现一直下降的趋势，而处于伪狂犬野毒感染预警值范围的样品比例则呈现先下降、后上升的趋势（表5和表6），证实了在gB抗体水平不高的情况下产生了伪狂犬野毒的感染。综合分析认为，对于这些猪群，应根据母源抗体水平调整免疫程序，以提高伪狂犬疫苗的免疫效果，尽可能延缓野毒的再次感染时间，并减少伪狂犬感染后可能引起的发病损失。表5 2017年使用普莱柯万泰试剂盒检测PRV gB抗体结果（A值）
注：临界值≤A值＜0.8在正常的疫苗免疫抗体范围，A值≥0.8或短时间内抗体水平急剧升高，提示可能存在伪狂犬野毒感染。表6 2017年使用BioChek试剂盒检测PRV gB抗体结果（ELISA滴度）注： 1071≤ELISA滴度＜8000在正常的疫苗免疫抗体范围，ELISA滴度＞8000或短时间内抗体水平急剧升高，提示可能存在伪狂犬野毒感染。 另外，从两种试剂盒的检测结果对比可以看出，对于不同阶段的猪群，普莱柯万泰试剂盒的检测阳性率均稍低于BioChek试剂盒的阳性率，根据前期的评价结果以及试剂盒供应商的说明，主要原因在于普莱柯万泰将试剂盒阳性判界设置在用新流行毒株攻毒后也可完全保护的滴度，因此略高于BioChek试剂盒的阳性判界。同时提示我们在临床应用检测数据指导生产时，要根据不同检测试剂的特点对检测结果进行分析。 2017年检测的PRRSV抗体阳性率为84.3%。其中包被N蛋白的检测试剂盒检测阳性率为76.4%，S/P值高于3.0的样品占5.4%（表7）；包被糖蛋白的试剂盒检测样品阳性率为90.8%，未出现IRPC值大于180的情况（表8）。两种试剂盒的检测结果均表明本年度绝大部分猪场的猪繁殖与呼吸综合征处于相对稳定状态，发病猪群较少，主要见于引种、转群等猪只移动后的点状发生。表7 2017年检测PRRS抗体结果
（包被N蛋白的试剂盒检测）
注：根据试剂盒供应商说明及前期检测数据，S/P值＞3.0，或短时间内抗体抗体水平急剧升高，提示猪群可能处于繁殖与呼吸综合征发病状态。表8 2017年检测PRRS抗体结果（包被糖蛋白的试剂盒检测）
注：对于商品猪群，IRPC值＞180或短时间内抗体水平急剧升高，提示猪群可能处于猪繁殖与呼吸综合征发病状态。 2017年检测FMDV（O型）抗体阳性率为82.2%（表9），免疫效果较为理想。但鉴于猪群中O型口蹄疫仍时有发生，提示我们应做好猪群中O型口蹄疫的抗原监测，并对当前疫苗对流行株的攻毒保护效果进行进一步评估。表9 2017年FMDV（O型）抗体检测结果
2017年进行了猪的常见病毒病的核酸检测，其中PRRSV、PCV2和PEDV的检出率较高，均在15%以上，PRV和PoRV次之，结果见表10和表11。 虽然核酸检出率较高，但根据血清学监测结果，PRRS在猪群中处于总体相对稳定的状态，发病猪群较少，发病猪群主要见于引种、转群等猪只移动后的点状发生。为了确定当前PRRSV的优势基因型，我们对其中78株PRRSV进行了进一步鉴定，6/78为经典株，18/78为高致病性蓝耳病变异株，其余的54株均属于NADC30-Like。结果表明，NADC30-Like毒株为当前的优势流行株。由于NADC30-Like毒株的高变性以及现售疫苗不能对其完全保护 [1-2]，因此除了考虑疫苗防控外，重要的是应做好引种监测及加强生物安全措施。 在出现腹泻的猪群中，大部分检出了猪流行性腹泻病毒（PEDV）、传染性胃肠炎病毒（TGEV）和轮状病毒（PoRV）这三种病原，但亦有部分腹泻猪群未能检测到这三种病原。说明除了检测这3种主要病原外，我们还应关注其它与腹泻相关的原因。 PCV2检出率总体较高，由于PCV2在猪群中感染较为普遍，所以抗原检出率较高也与目前的临床实际情况相符。鉴于PCV2对猪场的危害相对较轻，同时高抗体情况下病原可同时存在，难以净化，所以在相当长时间内，PCV2在国内猪群中将持续存在。另外，需要注意的是PCV3目前已在我国十几个省份检出，感染猪主要表现为皮炎肾病综合征以及繁殖障碍等。由于PCV2与PCV3的Cap蛋白氨基酸序列同源性仅有30%左右，推测目前的PCV2疫苗对PCV3不具有交叉保护性[3]。因此，在目前的情况下，猪场应做好引种监测及加强生物安全措施，以防引入PCV3。 临床送检样品均为经临床诊断初步怀疑为伪狂犬发病的猪场。核酸检测结果显示，2017年送检的猪场中，有17.2%的猪场出现了伪狂犬发病。需要注意的是，由于伪狂犬发病猪脏器呈灶性病变，取材不到位易导致无法检出，另外，因病毒血症时间短，血液中病原检出率较低，因此，临床送检时，取样必须准确，否则易出现临床症状典型、但实验室核酸检测无法检出的情况。 对PPV、JEV、SIV、PDCoV等病原进行了检测，结果均未检测到（数据未显示）。 对细菌的分离情况进行了统计和分析，结果见图1。结果显示，链球菌和大肠杆菌的分离率均达到了20%以上，葡萄球菌、副猪嗜血杆菌和沙门氏菌的分离率也都在10%以上，分离率均较高。对部分分离株进行了药敏试验，结果链球菌主要对头孢噻呋、阿莫西林、杆菌肽等高敏；大肠杆菌主要对头孢噻呋、硫酸黏菌素等高敏；副猪嗜血杆菌对头孢噻呋、甲砜霉素、硫酸粘菌素等高敏。 对2017年混合感染情况进行统计和分析，结果在混合感染病例中，PRRSV、PCV2和PRV三种病原的检出率最高，均在15%以上，结果见图2。这些病原可与病毒（PEDV、CSFV）和细菌（副猪嗜血杆菌、链球菌、葡萄球菌）等混合感染（数据未显示）。 2017年猪的病毒病仍以猪伪狂犬病和猪病毒性腹泻为主要问题，猪繁殖与呼吸综合征在个别猪群存在危害，而猪瘟及猪圆环病毒2型处于总体稳定状态。对于猪伪狂犬病，在原种场净化已见成效的情况下，下游引种企业应做好本场的阴性群维持工作，及时剔除阳性猪；同时，对于商品猪场，应采取适当措施，例如根据抗体监测情况，选择合适的首免日龄，调整免疫程序，以尽可能延缓野毒感染的时间。对于猪病毒性腹泻，目前感染无明显的季节性，一年四季均可发病，并且在表现腹泻的猪群中，除了检测PEDV、TGEV和PoRV这3种主要病原外，我们应同时关注其它腹泻相关的病因。猪细菌病中，链球菌与其他病原混合感染引起的保育及育肥猪喘气、咳嗽、消瘦等多见，部分有神经症状或猝死。细菌性疾病的预防控制过程中，除做好日常保健、环境控制，使用敏感药物控制症状外，还需找到其原发性病毒性病原，做好免疫预防，提高机体免疫力。
参考文献 [1] Bai Xiaofei, Wang Yuzhou, Xu Xin et al. Commercial vaccines Commercial vaccines provide limited protection to NADC30-like PRRSV infection. Vaccine, 2017, 34 (46): 5540-5545 [2] Li Chunge, Zhuang Jinshan, Wang Juan, et al. Outbreak Investigation of NADC30-Like PRRSV in South-East China. Transbound Emerg Dis, 2016, 63 (5): 474-479 [3] 湛洋, 王东亮, 王乃东等. 猪圆环病毒3型检测及其Cap结构序列和抗原性预测分析. 畜牧兽医学报, 2017, 6(48): 1076-1084来源： 北京中科基因技术有限公司
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