速检猪蓝耳病将添地方标准

速检猪蓝耳病将添地方标准

    5月23日，福建省质量技术监督局公布今年第一批地方标准制修订计划，由厦门检验检疫局所属海峡两岸农产品检验检疫技术中心孔繁德研究员小组提出的《猪繁殖与呼吸综合征抗体检测方法免疫金试纸法》获得立项。这将是我国建立的首个用免疫金试纸法检测猪蓝耳病标准。

免疫胶体金技术

    免疫胶体金技术是上世纪80年代继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶）后发展起来的固相标记免疫测定技术。最初该方法仅用于免疫电镜技术，现在已经发展到被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法以及免疫层析技术等。上世纪90年代，免疫胶体金检测试剂开始在人体医学上逐渐研发应用，目前已有数十种检测试剂在临床上应用。而动物医学方面的检测起步较晚，近几年报道的较多，已经开始引起兽医界的重视。免疫金传统方法主要应用在被动凝集试验、免疫金电镜染色法、免疫金光镜染色法和胶体金染色免疫印迹法，目前应用较多的为斑点免疫金渗滤法和胶体金免疫层析法。

孔繁德在实验室

    在猪蓝耳病免疫金试纸法快速检测研究小组成员中，除推广应用企业厦门波生生物技术有限公司人员外，其他成员（孔繁德研究员、陈信忠研究员、黄印尧高级兽医师、徐淑菲兽医师、龚艳清高级兽医师）均来自国家级甲壳动物检疫重点实验室（厦门）。这个实验室是厦门检验检疫局所属海峡两岸农产品检验检疫技术中心的重要依托，也为孔繁德研究小组提供了良好的科研环境和制度保障。

    5月23日，福建省质量技术监督局公布今年第一批地方标准制修订计划，由厦门检验检疫局所属海峡两岸农产品检验检疫技术中心孔繁德研究员小组提出的《猪繁殖与呼吸综合征抗体检测方法免疫金试纸法》获得立项。这将是我国建立的首个用免疫金试纸法检测猪蓝耳病标准。

    猪繁殖与呼吸综合征俗称“猪蓝耳病”，分布广泛，危害严重，给许多国家的养猪业造成严重的经济损失，其中“高致病性蓝耳病”被农业部将其列为动物一类传染病。该病极易引起继发感染（如猪瘟、猪细小病毒、伪狂犬病毒，尤其当前流行的猪圆环病毒），加剧病程，使死亡率升高。

    标准起草人孔繁德研究员的研究小组长期从事免疫金试纸条的研究工作，与厦门波生生物技术有限公司先后开发了猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫、禽流感、狂犬病和沙门氏菌等快速检测试纸条，同时制定了国家标准和检验检疫行业标准多项，作为集美大学和福建农林大学的硕士研究生导师，先后培养了7名硕士，组织了国家质检总局科研课题、福建省自然基金课题、厦门市科技项目等课题的研究工作，成果先后获得国家质检总局科技兴检三等奖、福建省科技进步三等奖和厦门市科技进步二、三等奖多项。上述经历为新标准的顺利完成，将提供强有力的技术保障。

    早在2002年，孔繁德研究员带领的研究小组与厦门波生生物技术有限公司联合成功研制了猪蓝耳病免疫金试纸法，并向农业部申报为新型检测试剂。该试剂经过大量田间试验，深受好评。

    研究人员曾应用酶联免疫吸附试验（ELISA试剂）、免疫金标检测试纸两种方法，同时对12头份猪血清样品进行猪繁殖与呼吸综合征血清抗体检测。结果12头份猪血清中繁殖与呼吸综合征抗体阳性率均为41.67%，符合率达到100%。研究人员还先后在福建、江苏等省部分猪场开展区域试验，共使用金标试纸条5930条，与ELISA试剂总体符合率为100%。ELISA试剂需要有酶标仪等仪器，试验时间相对较长，成本高，但能用准确的数字表达抗体水平；后者不需要任何仪器设备，既可检测血清又可检测血液、试纸常温保存、便于携带、单份检测、操作步骤少，只要15分钟即可用肉眼判定结果，适用于基层兽医站、养殖场使用以及大面积开展繁殖与呼吸综合征抗体检测。用户反映，这种试剂就像“傻瓜”照相机一样使用方便。

赫赫成绩单见证课题组成就

    近两年，研究人员在动物检疫快速检测科学领域取得了一系列成果——

    《猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬抗体免疫金快速检测试纸条》2003年5月成功开发，2005年8月完成区域性试验，申报农业部新试剂，5年来共生产检测猪瘟抗体和猪蓝耳病抗体的试纸条15万条左右，使用单位遍及全国。2009年6月《猪瘟抗体金标试纸检测方法》获批成为福建省地方标准。2011年5月，课题组顺利启动中国检验检疫行业标准（SN）和国家标准（GB）制订计划。

    《沙门氏菌检测试纸条》2006年7月成功开发，2005年12月完成区域性试验。本研究建立的沙门氏菌快速检测体系，对一系列反应条件进行了优化，成功研制成相应的快速检测试剂盒，已经在出入境检验检疫部门日常检测中使用。本试剂盒被公认为操作快速简便，成本低，结果准确等优点。

    《口蹄疫病毒抗体快速检测试剂的研制与应用》2011年5月申报2011年度厦门市科技进步奖。研制出的斑点免疫金渗滤法、免疫层析试纸条法两种试剂盒，为国内最早研究成功，使口蹄疫病毒抗体的检测速度从常规方法的2至3小时到1至12天缩短为15分钟，抗原的检测速度从几天缩短到到3至4小时。研制出的ELISA检测试剂，则可代替进口试剂，成本大为降低，检测效果与国内外同类产品一致。

    《禽流感通用抗原检测试纸条》。2005年4月成功开发，2006年8月完成区域性试验。

    《口蹄疫O型抗体检测试纸条》。2004年5月成功开发，2005年7月完成区域性试验。

    《口蹄疫3AB抗体检测试纸条》。2009年6月成功开发，2010年6月完成区域性试验。

    《副溶血弧菌快速检测试纸条》。2011年3月成功开发，目前正在开展区域性试验。

    《溶藻弧菌和副溶血弧菌快速检测试纸条的研制与应用》课题，2010年3月申报国家质检总局课题立项。