鸡大肠杆菌的耐药性试验

 随着养鸡业的发展,鸡大肠杆菌病的发生日趋严重,已成为养鸡场的常见病、多发病,对养鸡业的危害极为严重。目前, 抗生素作为防治大肠杆菌病的主要手段, 在临床上被广泛应用, 但实际发现有许多抗生素的效果不佳, 甚至无效。究其原因, 主要是广谱抗生素的不合理使用, 造成致病性大肠杆菌的抗药性增加。本试验对大同、阳泉、文水、太谷、榆次、长治六个地区分离的鸡源致病性大肠杆菌鉴定后进行耐药性分析, 筛选出高敏药物,为上述地区对鸡群作药物预防和治疗提供科学依据。
1 材料与方法[2]1.1 材料1.1.1 菌株  62株鸡源大肠杆菌, 分别来自大同、阳泉、文水、太谷、榆次、长治六个地区规模化养鸡场的病死鸡, 按常规方法由山西省农科院畜牧兽医研究所分离鉴定。其中大同8株、阳泉9株、文水7株、太谷11株、榆次15、长治12株,并分别以数字顺序编号。  1.1.2 培养基  麦康凯琼脂(不含结晶紫)、营养肉汤、营养琼脂、购于北京双旋微生物培养基制品厂。麦康凯琼脂培养基、营养肉汤、营养琼脂培养基、营养琼脂斜面、均按使用说明配制。  1.1.3 仪器   VITEX32全自动生化分析仪,法国制造。  1.1.4 药敏纸片   氨苄青霉素(AMP)、青霉素(P)、阿莫西林(AMX)、头孢唑啉(CFZ)、庆大霉素(GM)、卡那霉素(K)、阿米卡星(AN)、林可霉素(LM)、红霉素(E)、氯霉素(CMP)、链霉素(S)、恩诺沙星(EFX)、司帕沙星(SPFX)、氧氟沙星(OFL)、环丙沙星(CIP)、诺氟沙星(NOR)、呋喃妥因(AHD)、头孢拉定(CED)、头孢氨苄(CEL)、头孢噻吩(CF)、头孢噻肟(CTX)、头孢曲松(CRO)、安普霉素(APM)、多西环素(DO)、磺胺(SMX)、磷霉素(FOS)、痢特灵(FZ)等购于杭州天和微生物试剂有限公司和北京天坛药物生物技术开发公司。  1.2 方法  1.2.1 采样  对大同、阳泉、文水、太谷、榆次、长治六个地区疑似大肠杆菌病的病死鸡进行剖检,无菌采集典型病变组织(心、肝、脾),共采样286份,-20℃冰箱保存。  1.2.2 细菌的分离鉴定[3]将样品直接接种于麦康凯平皿,37℃培养24~48 h,将长成红色、中央微凸起的大肠杆菌可疑菌落连传1 代,获得大肠杆菌单个菌落。挑起菌株接种于普通琼脂斜面,37℃继续培养24~48 h,4 ℃冰箱保存备用。分离菌经形态学观察, 生长特性、生化试验,动物致病性试验,鉴定为致病性大肠杆菌。  1.2.3 药敏试验   按WHO推荐的Kirby-Bauer纸片扩散法进行,根据药敏试验结果计算不同地区鸡场的细菌耐药率和多重耐药率。
  2 结果
  2.1 62株鸡源致病性大肠杆菌对27种药物的敏感性  62株鸡源致病性大肠杆菌分离株对27种常见药物均有不同程度的耐受性, 而且敏感性也各不相同[4]。详见表1。
  
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